- 胡文潇;肖苏萍;陈敏;钱丹;
药食同源文化在我国有着悠久的历史，随着民众生活水平的不断提高，对养生保健的投入不断增长，大健康产业得到长足发展。药食同源物质得到越来越多的关注，成为健康产业的突破口和主力军，相关产业具有广阔的发展前景。但是目前药食同源产业面临诸多挑战，尤其是药食同源物质的质量标准研究中食品属性的标准研究尚处于起步阶段。因此，该文详细探讨了药食同源物质的质量标准研究现状，梳理了药食同源物质概念混淆情况，分析了药食同源物质质量标准研究中食品属性研究薄弱，安全性指标不统一等问题。基于药食同源物质的药用和食用双重属性，建议在其质量标准研究中需涵盖真实性、安全性、营养性和功效性。在确保来源真实性的情况下，结合双重属性衡量外源性有毒有害物质，确认其安全性，在标准制订中加强其食品属性的营养性部分，并依据药食同源物质自身来源与性质，选择不同的指标进行综合质量控制。利用多种技术从多角度进行整体控制，从而建立起适用于药食同源物质的一套系统质量标准，以期为药食同源物质的质量控制、安全使用和监管工作提供参考，从而促进整个产业健康发展。
2024年17期 v.49 4545-4552页 [查看摘要][在线阅读][下载 1285K] [引用频次：2 ] |[下载次数：1065 ] - 张辰辰;程蒙;李新月;田科;郑博文;陈敏;杨光;
近些年，随着人民生活水平的提高和保健意识的增强，药食同源物质需求呈稳步上升之势。促进药食同源产业的健康发展，满足人们对药食同源物质日益增长的需求，推广中医治未病理念，是实现健康中国的重要保障条件之一。药食同源中药材主要来源于种植，由于不科学使用农药或部分种植户片面地追求经济利益滥用农药，农药残留情况严重，影响了药食同源物质的安全性和有效性。农药残留问题受到越来越多人的关注，合理控制农药残留是药食同源物质研究的一项重要内容，而目前对于药食同源物质农药残留的现状梳理和分析较少。该文对近二十年发表的药食同源物质农药残留相关文献进行汇总分析，提出药食同源物质农药残留面临的问题，结合行业现状，提出针对药食同源物质农药残留控制的管理建议，进而为政府制订相关药食同源政策和标准提供数据和参考依据，促进药食同源产业高质量发展，保障中医药发展和健康中国战略发展的需要。
2024年17期 v.49 4553-4561页 [查看摘要][在线阅读][下载 1203K] [引用频次：9 ] |[下载次数：1134 ] - 曹佩;高萌萌;陈敏;张磊;
食药物质是指既是食品又是中药材的物质，在我国具有悠久的历史，是我国优秀传统文化和医药宝库的重要组成部分。我国食药物质以目录形式法治化管理有近40年的历史，目前已有100余种物质纳入我国食药物质目录。根据《按照传统既是食品又是中药材的物质目录管理规定》,安全性评估是申报食药物质目录的重要基础。食药物质安全性评估总体应遵循食品安全风险评估的原则和要求，但食药物质是一种复杂的混合物，开展安全性评估时，应综合考虑所评估对象的性质、数据充分性等，采取个案分析的原则并应用不同的评估模型和方法。随着大数据、人工智能、高通量高内涵体外测试、计算毒理等新一代技术的发展以及越来越多具有传统食用习惯且作为中药材使用的物质申报食药物质目录，风险评估的技术与方法也不断在食药物质、新食品原料以及地方特色食品的管理中应用，并发挥了重要的科学作用。该文就食药物质安全性评估的方法、面临的问题与挑战以及未来发展趋势等方面进行系统综述。
2024年17期 v.49 4562-4566页 [查看摘要][在线阅读][下载 1103K] [引用频次：1 ] |[下载次数：584 ] - 李洪梅;朱卫丰;陈晓凡;石强;王飞;刘志勇;李英帅;李玲孺;刘良徛;蒋小敏;伍建光;白云昇;杨锐;王宜;马晓北;刘红宁;王琦;王永炎;黄璐琦;
《国民营养计划(2017—2030年)》与《健康中国行动(2019—2030年)》提出大力发展传统食养服务，充分发挥我国传统食养在现代营养学中的作用，引导国民养成符合我国不同地区饮食特点的食养习惯。传统食养在我国的历史源远流长，是我国饮食及中医药文化的璀璨瑰宝之一，在疾病的预防、治疗以及养生延年方面发挥了重要作用。为弘扬中医药传统文化、指导和规范食养应用和推广，需制订中医药特色食养指南。立足于中医药理论与实践，辨证施食，因地制宜，结合现代营养学，中国中医科学院组织制订了该指南。该指南基于中医药理论与实践，针对不同体质人群，按照辨证食养，因人、因时、因地制宜，扶正、纠偏，荤素搭配，四气五味合和的原则，推荐相适应食材(包括按照传统既是食品又是中药材物质)。以其推动传统食养的普及和发展，为中国特色的营养健康模式贡献中医药力量。
2024年17期 v.49 4567-4571页 [查看摘要][在线阅读][下载 1093K] [引用频次：1 ] |[下载次数：785 ] - 李新月;张辰辰;程蒙;陈敏;钱丹;田科;杨光;
天麻为名贵中药材，2023年被正式批准成为药食同源物质品种。天麻作为食品的使用量逐年上升，其营养素含量成为大众关注热点之一，但缺乏营养素含量的系统性研究。天麻分布较广且规格较多，不同品种、产地、等级的天麻质量存在差异，该文选取不同品种的多产地多等级共76批天麻样品，涉及红天麻和乌天麻主要种植省份安徽、陕西、湖北、云南和少量种植区河南和东北三省产区，包含特级、一级、二级、三级、四级共5个等级，进行主要营养素含量测定及分析，探讨天麻营养素含量占比结构和不同品种、产地、等级天麻的营养素含量差异。结果显示，天麻富含多种营养素，蛋白质、脂肪、淀粉、粗纤维、总皂苷、水分、多糖、矿质元素、氨基酸、挥发油的总质量占比高达约96.00%,淀粉、水分、多糖三者占比最高，分别为64.52%、10.45%、8.32%,而不同品种、产地、等级之间天麻营养素含量也存在差异，不同品种的多糖含量差异最大，因此天麻药食同源产品的研究方向可倾向于开发代餐主食或多糖类功能性食品，该文为天麻在药食同源领域的研究提供参考。
2024年17期 v.49 4572-4577页 [查看摘要][在线阅读][下载 1123K] [引用频次：5 ] |[下载次数：1058 ]
- 董琳捷;龙江兰;张建;张瑜;鄢丹;
糖尿病作为典型的代谢性疾病，已被列为全球公共卫生领域的重大慢病范畴，降血糖药物研发长期以来备受国际新药创制领域关注的热点。降血糖药物体外评价模型与筛选技术是其研发过程中的关键环节，可显著减少后期临床试验的成本和风险，提高药物研发的成功效率。为此，该文对国内外经典和最新前沿的降血糖药物体外评价模型及其原理、方法与关键技术进行梳理，客观述评其优劣、特点、适应范围、实验设计、数据分析等，以期提升降血糖药物体外评价模型与筛选技术的规范性与共识性，服务于降血糖药物相关研发工作。
2024年17期 v.49 4578-4585页 [查看摘要][在线阅读][下载 1769K] [引用频次：0 ] |[下载次数：764 ] - 王颖;徐中华;延李科;崔灿;刘伟华;肖汉月;涂珺;
探究小檗碱介导脑和肌肉芳香烃受体核转位样蛋白1(brain and muscle arnt-like 1,BMAL1):昼夜自发输出周期蛋白kaput(circadian locomotor output cycles kaput, CLOCK)复合体，调控糖脂代谢改善脂肪胰岛素抵抗(insulin resistance, IR)的作用机制。地塞米松诱导96 h建立IR-3T3-L1脂肪细胞模型，0.5、1、5、10、20μmol·L~(-1)小檗碱给药24 h。葡萄糖氧化酶法和细胞活性(cell counting kit-8,CCK-8)试剂盒分别检测胞外葡萄糖含量和细胞活力；酶比色法检测甘油三酯(triglyceride, TG)和甘油含量；油红O染色检测脂滴；荧光染色检测Ca~(2+)、线粒体结构及活性氧(reactive oxygen species, ROS);蛋白免疫印迹(Western blot, WB)检测脂联素(adiponectin, ADPN)、BMAL1、CLOCK、激素敏感性脂肪酶(hormone-sensitive triglyceride lipase, HSL)、碳水化合物反应元件结合蛋白(carbohydrate-responsive element-binding protein, ChREBP)、固醇调节元件结合蛋白1C(sterol regulatory element-binding protein 1C,SREBP-1C)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活剂1α(peroxisome proliferator activated receptor γ coactivator 1α,PGC1α)、肉碱棕榈酰基转移酶1α(choline phosphotransferase 1α,CPT1α)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferators-activated receptors α,PPARα),免疫荧光检测BMAL1核定位。此外，添加20μmol·L~(-1) CLK8(CLOCK抑制剂)检测葡萄糖消耗量及BMAL1/ChREBP/PPARα蛋白。研究结果显示小檗碱增加IR-3T3-L1脂肪细胞葡萄糖消耗量，且不影响细胞活力；小檗碱降低IR-3T3-L1脂肪细胞胞内TG,5μmol·L~(-1)小檗碱升高甘油含量，减少脂滴积累，提示其加强脂解，而10μmol·L~(-1)小檗碱不影响甘油含量且脂滴更少，提示其可能同时加强脂解和甘油利用。此外，小檗碱降低IR-3T3-L1脂肪细胞胞内Ca~(2+)和ROS改善线粒体功能，上调PGC1α有助于维护线粒体结构。结果还显示小檗碱上调ADPN,提示其增加IR-3T3-L1脂肪细胞胰岛素敏感性，上调外周节律调控蛋白BMAL1和CLOCK并增加BMAL1核定位，上调脂解关键蛋白HSL和脂氧化限速酶CPT1α,下调TG合成关键蛋白SREBP-1C,小檗碱同时上调IR-3T3-L1脂肪细胞ChREBP和PPARα,以上结果共同提示其促糖转脂增强降糖效应。鉴于CLK8特异性抑制CLOCK酰基化修饰BMAL1形成复合体，结果显示CLK8添加小檗碱可降低葡萄糖消耗量，提示小檗碱上调BMAL1:CLOCK复合体改善糖代谢。CLK8添加小檗碱组上调BMAL1但下调ChREBP和PPARα,因而推测小檗碱介导BMAL1:CLOCK复合体调控细胞糖脂代谢减轻脂肪细胞IR。
2024年17期 v.49 4586-4596页 [查看摘要][在线阅读][下载 3107K] [引用频次：2 ] |[下载次数：679 ] - 刘检;杨蕙;赵洪庆;李薇;柳卓;王宇红;
探讨左归降糖解郁方调控小胶质细胞免疫受体分子样家族成员f(CD300f)/Toll样受体4(TLR4)信号改善糖尿病并发抑郁症(DD)大鼠海马突触微环境损伤的保护作用及机制。首先通过2周高脂饲料喂养+STZ注射+28 d慢性温和不可预测性应激加孤养复制DD大鼠模型，实验设正常组、模型组、CD300f阻断剂组(CLM1,2μg·kg~(-1))、CD300f激动剂组(Fcγ,5μg·kg~(-1))、阳性药组(二甲双胍0.18 g·kg~(-1)+氟西汀1.8 mg·kg~(-1))以及左归降糖解郁方高、低剂量组(20.52、10.26 g·kg~(-1))。采用旷场、强迫游泳实验评估大鼠抑郁样行为；生化分析检测血糖、胰岛素水平；酶联免疫吸附法检测海马组织中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)、5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)水平；透射电镜观察大鼠海马神经元突触超微结构变化情况；免疫荧光、Western blot分别检测大鼠海马小胶质细胞中CD300f、TLR4及海马神经元中突触素(SYN)、突触后密度蛋白95(PSD-95)表达情况。结果表明，与正常组比较，模型组大鼠旷场总活动路程减少，强迫游泳不动时间增加，血清胰岛素、海马组织中TNF-α、IL-1β、IDO水平升高，而5-HT和DA水平明显下降，且海马小胶质细胞中CD300f表达下调、TLR4表达上调，海马神经元中突触相关蛋白SYN、PSD-95表达降低，同时海马神经元突触超微结构明显受损；与模型组比较，CD300f阻断剂和激动剂分别加重和减轻上述异常改变；左归降糖解郁方高、低剂量则能显著改善大鼠上述抑郁样行为，分别抑制TNF-α、IL-1β、IDO异常升高和5-HT、DA减少，并有效增加小胶质细胞中CD300f表达，降低TLR4表达，上调海马神经元中突触前膜SYN和突触后膜PSD-95蛋白表达水平，最终改善海马突触微环境损伤。综上，该文证实了左归降糖解郁方能有效改善糖尿病并发抑郁症大鼠抑郁样行为，抑制海马小胶质细胞炎症激活，其机制可能与调控CD300f/TLR4信号进而缓解海马突触微环境损伤有关。
2024年17期 v.49 4597-4606页 [查看摘要][在线阅读][下载 2882K] [引用频次：2 ] |[下载次数：884 ] - 王洋琛;耿若愚;杨建华;马冲;代武;郭娅丽;张汉腾;徐梓轩;李新悦;马鑫鑫;胡君萍;文丽梅;
基于网络药理学、分子对接、动物实验，探究三七总皂苷(Panax notoginseng saponins, PNS)对糖尿病肾病(diabetic kidney disease, DKD)的治疗作用及其机制。基于网络药理学筛选潜在作用靶点，利用STRING数据库构建蛋白-蛋白互作网络，将筛选的核心靶点进行基因本体论(Gene Ontology, GO)和京都基因和基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG)信号通路的富集分析，并构建“成分-靶点-通路”的可视化网络，预测PNS防治DKD的潜在作用机制。从PNS中筛选出5个有效成分，其治疗DKD的核心靶点有AKT1、STAT3、ESR1、HSP90AA1、MTOR等；通过KEGG分析发现PNS治疗DKD相关的通路有癌症通路、化学致癌-受体激活、PI3K-AKT信号通路等；通过GO分析发现PNS治疗DKD主要涉及的生物过程有蛋白质结合、同种蛋白质结合、酶结合以及ATP结合等生物过程。将40只雄性6周龄db/db小鼠随机分为模型组、达格列净组、PNS低剂量组、PNS高剂量组，每组10只，将10只同周龄db/m小鼠作为空白组。干预组灌胃给药干预8周，空白组和模型组每日给予等量蒸馏水灌胃，每天1次，监测小鼠体质量和空腹血糖，并检测肾脏指数、尿微量白蛋白、肌酐、尿微量白蛋白/肌酐比值及尿素含量。采用苏木精-伊红(HE)染色、过碘酸雪夫(PAS)染色、马松(Masson)染色观察PNS对db/db小鼠的肾脏保护作用。结果发现PNS可显著降低db/db小鼠的空腹血糖水平，改善其肾脏损伤情况。Western blot验证实验显示PNS干预组可降低p-AKT1、p-STAT3的蛋白表达水平及p-AKT1/AKT1、p-STAT3/STAT3比值。此外，PNS高剂量组可下调PIK3CA的蛋白表达水平。综上，三七总皂苷可能是通过PI3K-AKT信号通路抑制STAT3靶点蛋白发挥良好的糖尿病肾脏保护作用。
2024年17期 v.49 4607-4616页 [查看摘要][在线阅读][下载 3539K] [引用频次：6 ] |[下载次数：2544 ]
- 徐少华;王舒舒;任涵;赵婉竹;周鹏;王靓;黄金玲;
观察苓桂术甘汤对心肌梗死(MI)后小鼠心肌纤维化(MF)及心肌组织大肿瘤抑制激酶1(Lats1)/Yes相关蛋白(Yap)信号通路的影响，探讨其抑制MF的作用和机制。采用冠状动脉左前降支结扎法构建MI后小鼠缺血模型，造模24 h后，连续干预6周。采用小动物超声成像系统检测小鼠左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)、左室收缩末期内径(LVIDs)、左室舒张末期内径(LVIDd);采用HE及Masson染色观察小鼠心肌组织病理学变化；采用ELISA法检测小鼠血清肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)水平；采用RT-qPCR法检测小鼠心肌组织Lats1、Yap、结缔组织生长因子(CTGF)mRNA水平；采用Western blot法检测小鼠心肌组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、胶原蛋白Ⅰ(ColⅠ)、胶原蛋白Ⅲ(ColⅢ)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、Lats1、Yap、磷酸化Yap(phosphorylation-Yap, p-Yap)、细胞核Yap(n-Yap)蛋白表达。与假手术组比较，模型组小鼠LVEF、LVFS水平显著降低，LVIDd、LVIDs水平显著升高(P<0.01);心肌细胞排列紊乱，心肌纤维部分断裂及胶原纤维大量沉积；小鼠血清CK-MB、LDH水平显著升高(P<0.01);心肌组织Lats1 mRNA水平显著降低(P<0.01),Yap、CTGF mRNA水平显著升高(P<0.01);心肌组织α-SMA、ColⅠ、ColⅢ、MMP2、Yap、n-Yap蛋白表达显著升高(P<0.01),Lats1、TIMP1、p-Yap蛋白表达及p-Yap/Yap比值显著降低(P<0.01)。与模型组比较，经高剂量苓桂术甘汤干预后，小鼠LVEF、LVFS水平显著升高，LVIDd、LVIDs水平显著降低(P<0.01);心肌细胞排列较整齐，心肌纤维断裂及胶原纤维沉积明显减少；小鼠血清CK-MB、LDH水平显著降低(P<0.01);心肌组织Lats1 mRNA水平显著升高(P<0.01),Yap、CTGF mRNA水平显著降低(P<0.01);心肌组织α-SMA、ColⅠ、ColⅢ、MMP2、Yap、n-Yap蛋白表达显著降低(P<0.01),Lats1、TIMP1、p-Yap蛋白表达及p-Yap/Yap比值显著升高(P<0.01)。苓桂术甘汤能够抑制MI后模型小鼠MF,改善小鼠心功能，此作用与其激活Lats1/Yap信号通路密切相关。
2024年17期 v.49 4702-4710页 [查看摘要][在线阅读][下载 2716K] [引用频次：3 ] |[下载次数：844 ] - 吴迎朝;吴芃;田欢;崔佳琦;左谦;皮大锦;陈利国;罗雪花;陈前军;欧阳明子;
研究开心散对化疗小鼠行为学和脑组织的影响，以探究开心散治疗荷瘤小鼠化疗性认知障碍的作用机制。将30只雌性BALB/c小鼠通过乳腺脂肪垫接种4T1乳腺癌细胞建立荷瘤小鼠模型，并随机均分为肿瘤组、阿霉素组和开心散组。通过旷场实验、高架十字迷宫实验、强迫游泳实验、悬尾实验、Morris水迷宫、新物体识别实验等行为学检测，苏木素-伊红染色、尼氏染色、固蓝染色、Fluoro-Jade B染色、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记、免疫荧光染色、透射电子显微镜等病理检测，运用网络药理学和全转录组学测序等方法分析化疗性认知障碍产生的机制以及开心散的作用靶点。结果显示，开心散可以防止化疗引起的行为学改变(P<0.001),增加旷场实验总运动路程和中央区停留时间比，增加高架十字迷宫实验开臂区探索时间，减少强迫游泳实验和悬尾实验静止时间，减少Morris水迷宫逃逸潜伏期和增加穿越平台次数，提高新物体识别实验认知指数；抑制化疗引起的前额叶皮质神经炎症、细胞凋亡、细胞自噬等组织损伤；并重塑化疗过程中前额叶皮质组织的RNA表达谱(P<0.05)。综上研究表明，开心散可能通过重塑化疗过程中前额叶皮质组织的RNA表达谱，减轻神经元组织损伤，最终缓解荷瘤小鼠的化疗性认知障碍。
2024年17期 v.49 4711-4722页 [查看摘要][在线阅读][下载 4637K] [引用频次：2 ] |[下载次数：906 ] - 李孟英;郭建文;邵翀羽;泮智勇;陈天杭;周科峰;周惠芬;万海同;
中风醒脑液在临床上已被用于治疗脑出血。然而，目前对中风醒脑液的药理作用尚不明确。探讨中风醒脑液的药理作用对指导脑血管疾病的治疗至关重要。向大鼠右侧尾状核注射Ⅶ型胶原酶建立体内脑出血模型。将SD大鼠随机分成5组，用Bederson评分法评估大鼠术后的神经功能缺损情况。核磁共振成像(MRI)用于评估脑出血的体积。苏木精-伊红(HE)染色观察脑组织病理改变，透射电镜(TEM)观察脑组织超微结构变化。流式细胞术测定活性氧(ROS)水平。免疫荧光双染法检测脑组织血肿周围神经元中铁转运蛋白标记物谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的表达。Western blot法检测脑出血后RNA解旋酶和ATP酶1(UPF1)、铁泵蛋白(FPN)、酰基辅酶A连接酶4(ACSL4)、环氧化酶2(COX2)、GPX4、NADPH氧化酶1(NOX1)和胱氨酸/谷氨酸逆向转运蛋白(SLC7A11)的表达。与模型组相比，中风醒脑液治疗5 d后大鼠神经功能障碍明显减轻，血肿体积减小，脑出血病理损伤减轻；与此同时，Fe~(2+)和氧化应激水平显著降低，抑制铁死亡的蛋白表达量显著增加。综上，中风醒脑液可通过显著抑制神经元铁死亡改善大鼠脑出血的预后，为中风醒脑液的临床应用提供了有价值的指导。中风醒脑液的抗铁死亡作用可能与促进膜转运蛋白SLC7A11和FPN的表达有关。
2024年17期 v.49 4723-4733页 [查看摘要][在线阅读][下载 2795K] [引用频次：2 ] |[下载次数：847 ] - 刘玉晖;常诗瑶;朱洪杨;李玉婷;游宇;
探究大豆苷元(daidxein)调控NOD样受体蛋白3(NOD-like receptor protein 3,NLRP3)信号通路对高糖诱导的巨噬细胞炎症反应的抑制作用。cell counting kit(CCK)-8法检测不同浓度大豆苷元对巨噬细胞RAW264.7细胞活力的影响，Western blot法检测不同时间和葡萄糖浓度下巨噬细胞的肿瘤坏死因子(TNF)-α蛋白表达水平，以及高糖诱导下巨噬细胞极化、Toll样受体4(TLR4)-髓分化因子88(MyD88)-NLRP3炎性小体等通路相关蛋白的表达水平，酶联免疫检测试剂盒(ELISA)检测巨噬细胞分泌的TNF-α、白细胞介素(IL)-18、IL-1β炎症因子的表达情况，免疫荧光检测经高糖诱导下的巨噬细胞中细胞核因子(NF)-κB p65的表达水平，DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)的表达情况，qRT-PCR检测巨噬细胞中NLRP3、TNF-α和IL-18 mRNA水平。结果发现，选用30 mmol·L~(-1)葡萄糖浓度诱导48 h可作为巨噬细胞损伤的最佳造模条件；与正常组相比，模型组可以显著改善巨噬细胞极化，增加TNF-α、IL-18、IL-1β炎症因子的分泌，显著增加ROS及NF-κB p65的表达，模型组巨噬细胞NLRP3、TNF-α和IL-18 mRNA与TLR4、MyD88、NLRP3、NF-κB p65、p-NF-κB p65、NF-κB抑制因子(I-κB)、p-I-κB、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、半胱氨酸蛋白酶前体(pro-caspase)-1、pro-IL-1β、cleaved IL-1β和pro-IL-18蛋白表达均显著升高；与模型组相比，大豆苷元10、20、40μmol·L~(-1)剂量组中巨噬细胞各炎症因子，炎症相关基因NLRP3、TNF-α和IL-18 mRNA,炎症相关蛋白TLR4、MyD88、NLRP3、NF-κB p65、p-NF-κB p65、I-κB、p-I-κB、ASC、pro-caspase-1、pro-IL-1β、cleaved IL-1β和pro-IL-18表达水平均显著下调，且ROS的表达明显降低。基于相关文献报道结合该实验结果发现，高糖可诱导巨噬细胞极化，促进炎症因子的分泌，大豆苷元能通过调节NLRP3炎症小体信号通路，抑制巨噬细胞ROS的表达从而减轻高糖诱导的巨噬细胞炎症反应。
2024年17期 v.49 4734-4743页 [查看摘要][在线阅读][下载 2249K] [引用频次：4 ] |[下载次数：1044 ] - 王振东;韩杉;顾继洪;黄志峰;刘梅仙;卓越;
盐补骨脂是临床常用补益药，但其潜在毒性限制了应用，反应性代谢产物(reactive metabolites, RMs)对蛋白质的共价修饰是盐补骨脂肝毒性一个不可忽视的因素。该研究基于液相色谱-质谱联用(liquid chromatography-mass spectrometry, LC-MS)技术探究盐补骨脂中主要毒性成分补骨脂素/异补骨脂素产生的RMs对蛋白质的共价修饰，探讨盐补骨脂所致肝损伤的作用机制。首先采用生化法检测小鼠丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)、过氧化氢酶(catalase, CAT)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)、还原型谷胱甘肽(reduced glutathione, GSH)、谷胱甘肽S转移酶(glutathione S-transferase, GST)的水平；通过苏木素-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色观察肝脏病理变化。随后，利用超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(ultra performance liquid chromatography-quadrupole-time-of-flight-mass spectrometry, UPLC-Q-TOF-MS)对盐补骨脂中的主要毒性成分补骨脂素/异补骨脂素以及产生的RMs进行鉴定，并对毒性成分/RMs与GSH及游离氨基酸的共价键加合物进行鉴定，进一步确定毒性成分对蛋白质上氨基酸的共价键修饰位点和修饰方式。将确定的RMs修饰方式添加到Proteome Discoverer的可变修饰中，结合液相色谱-四极杆轨道阱质谱联用技术，检测补骨脂素/异补骨脂素修饰的靶蛋白。最后，利用Label-free定量蛋白质组学技术，筛选差异蛋白，通过京都基因和基因组百科全书(KEGG)和基因本体论(GO)做进一步分析并进行qPCR实验验证。结果显示，与对照组比较，盐补骨脂组ALT、AST、MDA明显增高，SOD、CAT、GSH和GST均降低，并有剂量依赖性，小鼠肝细胞出现明显空泡化及炎性细胞浸润。此外，在给药组小鼠肝脏中鉴定到补骨脂素/异补骨脂素的5种RMs, 2种与GSH的加合物及1种与半胱氨酸的加合物。并且鉴定到10个被补骨脂素/异补骨脂素RMs修饰的蛋白质。给药组小鼠肝脏内检测到133个差异蛋白，其中92个上调，41个下调，主要涉及蛋白质、核糖体、rRNA、谷胱甘肽，影响蛋白酶体通路；qPCR结果与差异蛋白趋势一致。综上可得，补骨脂素/异补骨素的RMs可以与GSH共价键结合，并且修饰肝脏蛋白质的半胱氨酸及赖氨酸残基，毒性成分对蛋白质的共价键修饰可进一步导致肝毒性。盐补骨脂产生的氧化应激损伤可能与蛋白酶体及其复合物异常、核糖体及其核蛋白复合体生物合成、rRNA结合、谷胱甘肽结合等有关。
2024年17期 v.49 4744-4754页 [查看摘要][在线阅读][下载 2105K] [引用频次：1 ] |[下载次数：599 ] - 孟昭阳;赵娟;朱琴芳;向丹凤;孟晶晶;陈君君;姜波;胡玉洁;徐玲艳;张湘奇;邹欢;韩永龙;
采用网络药理学、分子对接技术和细胞实验探究华蟾素注射液(Huachansu Injection, HCSI)抗结直肠癌(colorectal cancer, CRC)的作用机制。课题组前期采用LC-MS/MS检测HCSI中16种蟾蜍内酯类成分的含量，以大于10 ng·mL~(-1)为标准，筛选出10种蟾蜍内酯类成分，通过SwissTargetPrediction数据库收集其潜在作用靶点；利用GeneCards、OMIM、TTD、PharmGKB数据库预测CRC相关靶点，通过Venny获得HCSI治疗CRC的交集靶点，并使用Cytoscape软件构建“活性成分-靶点-疾病”网络及靶点蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络，根据度值筛选关键靶点；对关键靶点进行基因本体论(Gene Ontology, GO)功能和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG)通路富集分析，并通过AutoDock软件对主要蟾蜍内酯活性成分和关键靶点进行分子对接；检测不同浓度的HCSI、伪异沙蟾毒精(psi-bufarenogin, BUF)和蟾毒它灵(bufotalin, BFT)对结直肠癌HCT116细胞的细胞活力、迁移能力和凋亡率的影响，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测HCT116细胞PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白的表达。筛选出HCSI的主要活性成分沙蟾毒精(arenobufagin)、BUF和BFT等8种，HCSI抗CRC的关键靶点EGFR、IL6和mTOR等20个，结合KEGG通路富集分析和分子对接结果，选择PI3K/Akt/mTOR信号通路进行验证。细胞实验结果表明，HCSI、BUF和BFT对HCT116细胞的增殖能力和迁移能力具有显著抑制作用，可诱导HCT116细胞凋亡，下调PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白表达，说明HCSI、BUF和BFT可通过mTOR和PIK3CA等靶点调控PI3K/Akt/mTOR信号通路，发挥抗CRC的作用。该研究为探究HCSI的抗肿瘤活性成分和作用机制提供理论依据。
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