- 张会雨;崔晓珊;陈原原;辛高杰;曹策;刘子馨;胥淑娟;高佳明;郭浩;付建华;
基于神经源性基因Notch同源蛋白1(neurogenic gene Notch homologous protein 1,Notch1)通路探讨人参皂苷Rg_1调控线粒体融合减轻HL-1细胞缺氧复氧(hypoxia/reoxygenation, H/R)损伤的具体机制。cell counting kit-8(CCK-8)法检测缺氧6 h、复氧2 h后HL-1细胞的相对活力；乳酸底物法检测细胞上清液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)活力；荧光素法检测三磷酸腺苷(adenosine triphosphate, ATP)含量；荧光探针检测细胞内活性氧(intracellular reactive oxygen species, Cyto-ROS)水平以及线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,ΔΨ_m);mito-Tracker和Actin共成像检测细胞内线粒体数量；荧光定量聚合酶链式反应和蛋白免疫印迹法检测Notch1、线粒体融合蛋白2(mitochondrial fusion protein 2,Mfn2)、线粒体融合蛋白1(mitochondrial fusion protein 1,Mfn1)的mRNA和蛋白表达水平。结果显示，与对照组相比，模型组细胞活力降低，释放到细胞培养上清液中的LDH增加，Cyto-ROS增加，ATP含量降低。与模型组相比，人参皂苷Rg_1组细胞活力升高，释放到细胞培养上清液中的LDH减少，Cyto-ROS降低，ATP含量升高。人参皂苷Rg_1可升高H/R损伤HL-1细胞ΔΨ_m,增加线粒体数量，对线粒体具有较好的保护作用。H/R损伤后，Notch1、Mfn1 mRNA和蛋白表达降低，Mfn2 mRNA和蛋白表达升高；人参皂苷Rg_1可显著升高Notch1、Mfn1 mRNA和蛋白表达，降低Mfn2 mRNA和蛋白表达；Notch1沉默则抑制人参皂苷Rg_1的作用，降低Notch1、Mfn1 mRNA和蛋白表达，升高Mfn2 mRNA和蛋白表达。综上所述，人参皂苷Rg_1可通过Notch1通路调控线粒体融合减轻HL-1细胞H/R损伤。
2025年10期 v.50 2711-2718页 [查看摘要][在线阅读][下载 693K] [引用频次：0 ] |[下载次数：580 ] - 王新嫄;陈之;刘颖;孙健;李茹洁;王志国;张美玉;
中枢敏化(CS)是引发神经病理性疼痛(NPP)的重要因素，而信号转导蛋白1(Epac1)-压电型机械敏感离子通道元件2(Piezo2)关联是启动CS的一条新的重要通路。该文旨在揭示麻芎散中枢止痛作用是否通过同步调控脑内侧缰核(MHb)和脚间核(IPN)的Epac1-Piezo2信号通路来实现。采用动态活体的脑微透析技术，结合高效液相-荧光色谱法(HPLC-RFC)以及动物行为学、免疫组化、蛋白免疫印迹和定量逆转录PCR等技术，以坐骨神经部分损伤(SNI)大鼠为工具，考察麻芎散对MHb和IPN区Epac1和Piezo2蛋白和基因的分布与表达，以及细胞外液中谷氨酸(Glu)、天门冬氨酸(Asp)和甘氨酸(Gly)变化规律的影响。与假手术组相比，SNI组大鼠镇痛活性显著降低，冷痛敏评分显著升高，MHb和IPN区Glu含量也显著升高，MHb和IPN区Piezo2阳性细胞数、Epac1和Piezo2蛋白和基因水平也显著升高。与SNI组相比，麻芎散给药后大鼠的镇痛活性显著升高，冷痛敏评分明显降低；麻芎散可显著降低MHb和IPN区Glu含量以及MHb区Gly含量，也能明显升高MHb和IPN区Asp含量；同时，麻芎散也能显著减少上述2个脑区的Piezo2阳性细胞数，以及显著降低Epac1和Piezo2蛋白和基因的表达。麻芎散的中枢镇痛作用可能与其抑制大鼠脑MHb和IPN区细胞外液中Glu和Gly的释放，升高两脑区Asp含量，降低两脑区内Epac1、Piezo2的蛋白和基因表达，调控两脑区内Epac1-Piezo2通路有关。以上结果可部分阐明麻芎散临床止痛功效的科学依据，为NPP的临床治疗提供新的思路和方法。
2025年10期 v.50 2719-2729页 [查看摘要][在线阅读][下载 981K] [引用频次：0 ] |[下载次数：267 ] - 张陈芳;刘凯;范超文;邰美婷;张鑫;张蓉;陈琴文;柯尊丽;
探讨温脾丸对非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fat liver disease, NAFLD)的改善作用。实验分为2个部分，分别采用高脂饮食(high-fat diet, HFD)诱导和蛋氨酸-胆碱缺乏饮食(methionine and choline deficient diet, MCD)诱导的C57BL/6小鼠模型。HFD诱导的实验周期为16周，MCD诱导实验持续时间为6周。对2个部分实验小鼠均进行分组，分为对照组、模型组、温脾丸低剂量组(3.875 g·kg~(-1),WPP＿L组)、温脾丸高剂量组(15.5 g·kg~(-1),WPP＿H组)。HFD诱导实验小鼠取材后，对血清和肝脏中脂质含量进行检测，同时检测血清中肝功能指标以及对肝脏进行病理学检查，采用实时荧光定量反转录PCR检测脂质相关基因的表达。MCD实验部分的小鼠取材后检测血清中肝功能指标和炎症因子表达水平，并分别采用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色和广泛靶向脂质组学分析肝脏的病理及脂质变化的情况。HFD诱导实验结果显示，与HFD模型组比较，温脾丸给药后可以显著降低小鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)、丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)、甘油三酯(triglyceride, TG)及总胆固醇(total cholesterol, TC)的水平，且WPP＿H组效果更好；HE染色结果显示，与HFD模型组比较，给药后白色脂肪的脂肪细胞形态有所改善，体积变小，且肝脏的脂肪变性及脂滴的积累都得到了改善；实时荧光定量反转录PCR结果显示，温脾丸可能通过增加肝脏胆固醇转化基因肝X受体α(liver X receptorα,LXRα)、细胞色素P450家族27亚家族A成员1(cytochrome P450 family 27 subfamily A member 1,CYP27A1)、脂质消耗基因过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferators-activated receptors α,PPARα)、腺苷单磷酸活化蛋白激酶(adenosine mono-phosphate-activated protein kinase, AMPK)mRNA的表达以及降低脂质合成基因脂肪酸合成酶(fatty acid synthetase, FAS)、硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-CoA desaturase 1,SCD1)、固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element-binding protein 1c, SREBP-1c)mRNA的表达，从而减少肝脏的脂质积累。MCD诱导实验结果显示，与MCD模型组相比，温脾丸给药后可降低血清中ALT、AST和炎症因子的水平，从而减轻肝损伤和炎症反应；肝脏HE染色显示温脾丸可有效改善肝脏的脂质变性；肝脏脂质组学结果显示，温脾丸可以改善肝脏的脂质代谢紊乱，其主要是通过影响TG和胆固醇酯的代谢实现的。综上，温脾丸具有改善HFD和MCD诱导的NAFLD小鼠肝脏脂质积累的作用，主要通过减轻肝脏损伤、炎症和调节脂质代谢的途径实现。
2025年10期 v.50 2730-2739页 [查看摘要][在线阅读][下载 810K] [引用频次：0 ] |[下载次数：557 ] - 杨运劼;叶彬华;邱晨;吴涵卿;黄博威;王桐;阮诗玮;郭芳;王建挺;江铭倩;
旨在探讨益肾降糖饮调控内质网应激(ERS)介导NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体改善糖尿病肾病db/db小鼠肾损伤的作用机制。将30只db/db小鼠随机分为模型组、益肾降糖饮组、ERS抑制剂4-苯基丁酸(4-PBA)组，每组10只，另选10只db/m小鼠作为对照组。益肾降糖饮组予益肾降糖饮0.01 mL·g~(-1)灌胃，4-PBA组予4-PBA 0.5 mg·g~(-1)灌胃，对照组和模型组予等体积羧甲基纤维素钠灌胃，每日1次，连续8周，每2周记录各组小鼠摄食量、饮水量及体质量。干预结束后检测各组小鼠空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、尿微量白蛋白(U-mALB)、24 h尿量、血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN),酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测炎症指标白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)水平，苏木精-伊红(HE)、过碘酸-雪夫(PAS)、马松(Masson)染色及透射电镜(TEM)观察肾组织病理，蛋白免疫印迹法检测各组肾组织中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、NLRP3、含有CARD结构域的凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(caspase-1)和消皮素D(GSDMD)的表达。结果显示，与对照组相比，模型组小鼠一般状态不佳，体质量、摄食量、饮水量、FBG、HbA1c、U-mALB、肾脏指数、24 h尿量、IL-1β、IL-18水平明显升高。与模型组相比，益肾降糖饮组和4-PBA组小鼠一般状态改善，体质量升高，摄食量、FBG、U-mALB、肾脏指数、24 h尿量、IL-1β水平显著下降；益肾降糖饮组IL-18水平显著下降；4-PBA组饮水量、HbA1c显著下降；益肾降糖饮组饮水量、HbA1c虽有下降趋势，但差异无统计学意义。各组BUN、Scr、肾脏质量无显著差异。肾脏病理染色显示，模型组较对照组肾脏病理损伤严重，可见肾小球系膜弥漫性增生，肾小管水肿，管腔扩张，肾间质见大量炎性细胞浸润，基底膜见糖原染色及蓝色胶原沉积明显增多；益肾降糖饮组及4-PBA组可见肾脏损伤、糖原染色及胶原沉积不同程度改善，其中益肾降糖饮组改善更明显。TEM提示模型组肾组织胞质大面积水肿，基底膜均质性增厚，足突数量较少，多数融合变宽；益肾降糖饮组及4-PBA组肾组织胞质水肿减轻、基底膜完整均匀，足突融合改善。蛋白免疫印迹检测结果表明，与对照组相比，模型组GRP78、CHOP、GSDMD、NLRP3、ASC、caspase-1表达上调；与模型组相比，益肾降糖饮组、4-PBA组GRP78、CHOP、GSDMD、NLRP3、ASC、caspase-1表达下调。上述研究表明，益肾降糖饮通过抑制ERS减轻NLRP3炎症小体活化，改善db/db小鼠炎症反应，从而发挥其保护糖尿病肾病的作用。
2025年10期 v.50 2740-2749页 [查看摘要][在线阅读][下载 779K] [引用频次：0 ] |[下载次数：1122 ] - 朱晓瞳;田良良;张晶晶;杨洪军;
该研究结合代谢组学和转录组学探讨安宫牛黄丸即刻给药干预创伤性颅脑损伤的作用机制。利用经过优化处理的Feeney自由落体撞击技术成功构建了大鼠创伤性颅脑损伤(TBI)模型，依据随机数字表法将实验大鼠分为假手术(sham)组，模型(Mod)组，阳性药物(吡拉西坦，piracetam)组，安宫牛黄丸低、高剂量(ANP-L、ANP-H)组。通过尼氏染色、免疫荧光检测尼氏小体数和B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、半胱天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)和肿瘤蛋白53(TP53)在脑组织的表达，酶联免疫吸附测定(ELISA)检测大鼠脑组织中炎症因子前列腺素内过氧化物合成酶2(PTGS2)表达水平。对sham组、Mod组和ANP-H组大鼠脑组织进行代谢组学与转录组学的分析，通过基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)进行富集分析，表示安宫牛黄丸干预TBI的作用机制。同时，整合代谢组学和转录组学分析发现了安宫牛黄丸干预TBI的代谢途径。结果表明，安宫牛黄丸显著升高TBI大鼠脑组织尼氏小体的数量，明显增加Bcl-2的表达量，明显减低caspase-3、TP53、PTGS2等蛋白的表达水平。与Mod组对比，ANP-H组明显上调12个差异代谢产物(DMs),下调了25个DMs,筛选出了5条关键的代谢路径，包括甘油磷脂代谢、嘧啶代谢，以及甘氨酸、苏氨酸和丝氨酸代谢，还有精氨酸与脯氨酸代谢、D-氨基酸代谢。转录组学发现了730个表达上调的差异基因(DEGs),以及612个表达下调的差异基因。富集分析显示，与炎症反应及凋亡过程紧密相关的生物学功能和包括磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)等关键信号通路得到了显著富集。结合转录组学和代谢组学的数据分析，识别出甘油磷脂、嘧啶和甘氨酸、苏氨酸及丝氨酸代谢等3个关键代谢路径。
2025年10期 v.50 2750-2760页 [查看摘要][在线阅读][下载 1389K] [引用频次：0 ] |[下载次数：1016 ] - 封俨宸;刘雅利;党雪;孙璐;李金瑶;宋佳斌;杨顺智;刘飞祥;
基于“诸髓皆属于脑”理论，探讨左归丸调节催产素(oxytocin, OXT)/催产素受体(oxytocin receptor, OXTR)前馈环路抗绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis, PMOP)的机制。采用去卵巢法建立PMOP大鼠模型，70只SD雌性大鼠随机分为假手术组，模型组，雌二醇组(17β-雌二醇，0.05 mg·kg~(-1)·d~(-1)),左归丸低、中、高剂量组(0.2、0.4、0.8 g·kg~(-1)·d~(-1))及拮抗剂组(阿托西班0.9 mg·kg~(-1)·d~(-1)+17β-雌二醇0.05 mg·kg~(-1)·d~(-1)+左归丸0.4 g·kg~(-1)·d~(-1))。造模12周后，每日灌胃1次，持续12周后取材。酶联免疫吸附检测(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)法测定血清雌激素(estrogen, E_2)、OXT、抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(tartrate-resistant acid phosphatase-5b, TRACP-5b)和骨碱性磷酸酶(bone alkaline phosphatase, BALP)水平；苏木精-伊红染色观察左侧股骨远端病理形态学变化；微计算机断层扫描技术(micro-computed tomography, micro-CT)分析右侧股骨远端显微结构；蛋白质印迹分析法检测胫骨组织中OXTR、小型GTP结合蛋白(Ras small GTP-binding protein, Ras)、Raf1原癌基因(Raf1 proto-oncogene, Raf1)、丝裂原活化蛋白激酶激酶1/2(mitogen-activated protein kinase kinase 1/2,MEK1/2)、细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2)蛋白及磷酸化蛋白的表达水平。与模型组比较，左归丸中、高剂量组大鼠血清中E_2、OXT与BALP水平显著增加，TRACP-5b水平显著降低；左侧股骨远端骨小梁排列紧密；左归丸高剂量组右侧股骨远骨纤维结构明显改善；胫骨组织中OXTR、Ras、p-Raf1、p-MEK1/2、p-ERK1/2蛋白表达均显著增加。加入OXTR拮抗剂干预后，左归丸高剂量组的疗效被部分抑制。以上结果表明左归丸可通过调节OXT/OXTR前馈环路，激活下游Ras/Raf1/MEK/ERK通路的磷酸化，提高骨密度，发挥治疗PMOP的作用。
2025年10期 v.50 2761-2768页 [查看摘要][在线阅读][下载 513K] [引用频次：0 ] |[下载次数：268 ] - 孙艺璇;范佳丽;吴晶晶;陈丽娟;贺江华;徐文娟;董玲;
葛根芩连汤(GQD)是临床治疗溃疡性结肠炎(UC)的经典名方，该研究基于GQD治疗对不同胆汁酸水平UC小鼠药效差异，明确胆汁酸对UC及药效影响，进一步研究小鼠肝脏内胆汁酸受体表达，初步揭示GQD干预胆汁酸合成治疗UC的作用机制。建立葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的UC小鼠模型，根据一般情况、疾病活动指数(DAI)评分、结肠长度和苏木素-伊红(HE)染色结肠组织病理切片评价GQD药效。酶联免疫吸附测定(ELISA)法和Western blot法评估结肠组织炎症反应情况。全自动生化分析仪检测血清总胆汁酸(TBA)水平同时评估肝胆损伤情况。Western blot法和实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)法检测肝组织胆汁酸受体和胆汁酸合成酶表达水平。结果显示，与模型组相比，GQD治疗下UC小鼠DAI评分、结肠缩短及结肠组织病理学损伤有明显改善，结肠中促炎因子TNF-α和IL-6显著降低，血清TBA显著降低，同时血清碱性磷酸酶(ALP)显著升高。胆酸(CA)干预后，与GQD组相比，CA+GQD组UC显著加重，药效指标DAI评分、体质量下降程度、结肠损伤程度、总胆汁酸水平及肝损伤指标显著升高；与CA组相比，CA+GQD组能显著降低总胆汁酸水平，UC药效指标均不同程度显著改善，说明GQD可以恢复CA加重的UC损伤。进一步研究肝脏内胆汁酸受体及合成酶表达差异，显示GQD作用下肝脏中法尼醇X受体(FXR)和小异二聚体伴侣受体(SHP)表达显著上调、G蛋白偶联受体5(TGR5)和胆固醇7α-羟化酶(Cyp7A1)表达显著降低。研究表明GQD可影响胆汁酸受体及合成酶，通过FXR/SHP通路抑制胆汁酸合成治疗UC。
2025年10期 v.50 2769-2777页 [查看摘要][在线阅读][下载 1305K] [引用频次：0 ] |[下载次数：731 ] - 梁梦迪;梁月润;程瑾;杨亚平;夏萱;杨文哲;郝杰杰;
为研究丁香酸乙酯(MD)对溃疡性结肠炎(UC)的治疗作用及其机制，采用MTT法检测不同浓度MD(50、100、200、400μmol·L~(-1))对RAW264.7细胞和HT-29细胞的增殖抑制情况；通过脂多糖(LPS)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导RAW264.7细胞和HT-29细胞构建UC细胞模型，2.5%葡聚糖硫酸钠盐(DSS)诱导小鼠构建动物模型，验证MD对UC的治疗效果。实验分为对照(control)组、模型(LPS或TNF-α)组和不同浓度(50、100、200、400μmol·L~(-1))MD组，采用一氧化氮(NO)试剂盒检测细胞内NO水平；采用激光共聚焦显微镜和活性氧(ROS)试剂盒检测细胞内ROS水平；采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞及动物组织内白细胞介素-6(IL-6)、TNF-α、干扰素-γ(INF-γ)、白细胞介素-10(IL-10)和髓过氧化物酶(MPO)的含量变化；采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞及动物组织内磷酸化Janus激酶2(p-JAK2)、Janus激酶2(JAK2)、磷酸化信号转导及转录激活蛋白3(p-STAT3)、信号转导及转录激活蛋白3(STAT3)、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)、闭合蛋白(occludin)、紧密连接蛋白-1(claudin-1)表达水平。以上实验结果显示，MD可以通过抑制NO、ROS的产生，调控炎症因子的表达改善炎症反应；显著降低小鼠疾病活动指数(DAI)指数，改善其结肠缩短现象并通过抑制JAK2/STAT3通路的激活，修复肠上皮损伤从而发挥抗UC活性。
2025年10期 v.50 2778-2786页 [查看摘要][在线阅读][下载 1242K] [引用频次：0 ] |[下载次数：1009 ] - 张梦;萧闵;李晶晶;李蒋凤;樊光辉;
探讨红景天苷(salidroside, SAL)对氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein, oxLDL)诱导的小鼠主动脉内皮细胞(mouse aortic endothelial cell, MAEC)黏附分子表达的影响及机制。构建oxLDL诱导的内皮细胞损伤模型，筛选SAL安全浓度和作用时间。将细胞分为对照组，oxLDL组，SAL低、高浓度组和铁抑素-1(ferrostatin-1,Fer-1)组，CCK-8法检测细胞存活率；比色法检测乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)释放量；免疫荧光检测细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1)及血管细胞黏附分子-1(recombinant vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1)的表达水平；试剂盒检测细胞Fe~(2+)、谷胱甘肽(glutathione, GSH)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal, 4-HNE)水平；DCFH-DA探针检测细胞活性氧(reactive oxygen species, ROS)水平；Western blot检测细胞谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、沉默信息调节因子1(silent mating type information regulation 2 homolog 1,SIRT1)和核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)的表达；使用Nrf2、SIRT1抑制剂，将内皮细胞分为对照组、oxLDL组、SAL组、Nrf2抑制剂(ML385)组及SIRT1抑制剂(EX527)组，电镜观察线粒体超微结构；流式仪检测线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential, MMP)水平；Western blot检测细胞SIRT1、Nrf2、溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)、GPX4、膜铁运转蛋白1(ferroportin 1,FPN1)、铁蛋白重链1(ferritin heavy polypeptide 1,FTH1)、ICAM-1及VCAM-1的表达。结果显示，与Fer-1作用相似，低、高浓度的SAL能够提高oxLDL诱导的内皮细胞存活率，抑制LDH释放和ICAM-1、VCAM-1表达(P<0.05或P<0.01),与SAL提高细胞GSH水平，降低Fe~(2+)、ROS、MDA、4-HNE水平，上调SIRT1、Nrf2和GPX4表达抑制铁死亡有关(P<0.05或P<0.01),以高浓度SAL组干预效果最为显著；而ML385、EX527能够部分抵消SAL对线粒体结构和MMP的保护作用，逆转SAL上调SIRT1、Nrf2、SLC7A11、GPX4、FPN1和FTH1表达，下调ICAM-1、VCAM-1表达的效应(P<0.05或P<0.01)。综上，SAL减少oxLDL诱导的内皮细胞ICAM-1、VCAM-1的表达，与激活SITR1/Nrf2介导的SLC7A11/GPX4抗氧化信号通路，上调FPN1、FTH1表达抑制铁死亡有关。
2025年10期 v.50 2787-2797页 [查看摘要][在线阅读][下载 1023K] [引用频次：0 ] |[下载次数：610 ] - 颜子杰;张琳;韩鑫瑶;马天鹏;周松晶;
旨在评估益智仁-防风对糖尿病肾病(DKD)小鼠模型的治疗效果，探索其通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路，调控核苷酸结合寡聚结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体的潜在机制，为中药干预DKD提供理论支持。通过中药系统药理学平台筛选药物活性成分及潜在靶点，利用分子对接、分子动力学模拟与动物实验探索益智仁-防风的分子机制。db/db小鼠随机分为模型组、益智仁-防风低剂量组、益智仁-防风高剂量组、卡格列净组；db/m小鼠为正常组；适应性喂养1周后进行药物干预。从给药1周后开始，每2周检测小鼠体质量、血糖及24 h尿蛋白(24hUP),给药13周后取材，并检测指标[血糖、24hUP、尿微量白蛋白(mAlb)、肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)]水平。通过苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织病理变化；酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-18、半胱天冬酶1(caspase-1)含量；实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测IL-1β、IL-18、caspase-1、NLRP3 mRNA表达水平；蛋白免疫印迹法(Western blot)检测NLRP3、PI3K、p-Akt、Akt、p-mTOR、mTOR蛋白表达水平。网络药理学分析显示，wogonin、pinocembrin、hancinol、kaempferid是治疗DKD的核心化合物；分子对接及分子动力学模拟显示，核心化合物(特别是wogonin)能靶向结合PIK3R1,调控PI3K/Akt/mTOR通路；动物实验显示，益智仁-防风低、高剂量及卡格列净可显著降低db/db小鼠血糖、24hUP、mAlb、Scr、BUN水平，改善肾脏病理损伤与炎性细胞浸润，降低肾脏caspase-1、IL-1β、IL-18 mRNA及在血清中的分泌水平，抑制肾脏NLRP3 mRNA及蛋白表达水平，降低PI3K、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白表达水平。综上，益智仁-防风可能通过调控PI3K/Akt/mTOR信号通路，抑制NLRP3炎性小体活性，从而改善DKD小鼠肾脏炎症反应。
2025年10期 v.50 2798-2809页 [查看摘要][在线阅读][下载 1341K] [引用频次：0 ] |[下载次数：1509 ]