- 李兵;于亚南;王朋倩;张莹莹;陈寅萤;刘骏;王池社;颜新云;王忠;
模块药理学通过对多维度、多靶点生物网络的系统解构阐释疾病复杂机制和药物多靶点相互作用关系，在疾病发生发展机制、病证生物学基础、中药多靶点药理机制解析、方剂组方配伍规律研究、中药复方新药发现等领域取得了应用进展。多组学数据和生物网络的复杂性特点为网络的模块化解构和应用带来障碍，该文研究构建了“模块药理计算平台”在线分析系统，针对定量表达谱数据和蛋白-蛋白相互作用(PPI)数据实现网络构建与模块划分、模块判别分析、主要模块分析、模块内关系分析、模块间关系分析、网络拓扑和可视化等功能，为基于模块药理学的复杂疾病和多靶点药物机制研究提供有力工具。平台将在疾病模块识别与关联机制、中医药科学原理解读、中药及方剂复杂作用机制解析、多靶点药物发现等领域具有广阔的应用空间。
2024年13期 v.49 3414-3420页 [查看摘要][在线阅读][下载 1814K] [引用频次：0 ] |[下载次数：518 ] - 陈志远;程荣双;阿依夏·吾不力卡斯木;刘玉霜;王凯波;
DNA G-四链体(G4)是富含鸟嘌呤的单链DNA序列，在生理溶液环境下，通过Hoogsteen氢键结合，并被单价阳离子稳定，自发折叠形成的一种球状四链体DNA二级结构。G4s在端粒和癌基因启动子序列中大量存在，与癌症的发生发展密切相关，是有潜力的抗癌药物研究新靶点。天然产物长期以来一直是抗癌药物发现的重要来源。近年来，以DNA G4s为靶点的天然药物研究取得了重大进展，许多DNA G4s被证实为天然产物的有效作用靶点，包括MYC-G4、KRAS-G4、PDGFR-β-G4、BCL-2-G4、VEGF-G4和端粒G4等。该文系统总结了天然小分子化合物识别DNA G4s的分子机制和研究进展，进而讨论了开发G4靶向药物面临的机遇和挑战，为天然抗癌创新药物研发提供了重要的参考。
2024年13期 v.49 3421-3431页 [查看摘要][在线阅读][下载 1785K] [引用频次：1 ] |[下载次数：568 ] - 张龙;李静宇;徐世强;王继华;
分子生药学是一门新兴的交叉学科，以分子生物学和中药学为基础，旨在研究药用植物的次生代谢产物合成和分子调控功能。穿心莲Andrographis paniculata是一种传统大宗中药材，具有保肝利胆、清热解毒和抗菌消炎等重要功效。穿心莲生产过程中受品种、产地环境、种植技术等原因造成的品质不稳定是穿心莲产业持续发展的重要限制因素，基于分子生药学的研究手段，采用现代组学技术进行穿心莲次生代谢产物调控研究已成为解决其品质问题的关键方法。该文总结了近年来穿心莲分子生药学领域的研究成果，包括资源的分子鉴定、遗传多样性、多组学技术、有效成分生物合成和种质创新等，并对该领域的发展趋势进行了展望。深入推动穿心莲分子生药学研究将为进一步开发其药用价值提供更加科学和有效的技术支持，为穿心莲新品种培育提供新思路，有效推动穿心莲产业的高质量可持续发展。
2024年13期 v.49 3432-3440页 [查看摘要][在线阅读][下载 1155K] [引用频次：1 ] |[下载次数：1115 ] - 李纪新;邱林杰;任燕;王文茹;杨振宇;李美洁;栗文婕;张晋;
2型糖尿病(type 2 diabetes, T2DM)是以葡萄糖毒性、脂肪毒性、胰岛素抵抗等病理表现为主要特征的代谢紊乱疾病，是亟待解决的全球性健康问题。肥胖是T2DM发生发展的关键危险因素，肥胖合并T2DM增加了胰岛素抵抗和代谢异常程度。研究发现，脂肪与胰岛组织炎症微环境平衡的打破，是T2DM发生发展的重要原因。巨噬细胞是脂肪和胰岛组织免疫稳态及炎症反应的主要参与者，肥胖合并T2DM个体存在M1/M2巨噬细胞极化平衡紊乱，推动了糖脂代谢异常的进展。因此，恢复巨噬细胞极化的平衡，是治疗肥胖合并T2DM的重要途径。相关科研人员已证明中医药疗法可调控巨噬细胞极化实现对肥胖合并T2DM的治疗。因此，该研究基于现有证据，系统综述中医药靶向M1/M2巨噬细胞极化平衡改善肥胖合并T2DM的研究进展，以期为肥胖合并T2DM的中医药临床诊治及生物学基础的探索提供证据支持。
2024年13期 v.49 3441-3451页 [查看摘要][在线阅读][下载 1242K] [引用频次：8 ] |[下载次数：2500 ] - 宋鉴书;曹策;李浩然;李磊;刘建勋;
心肌缺血是一种发病率和病死率较高的疾病，通过再灌注恢复缺血区域的血液供应是目前较为有效的干预手段。然而大量的研究表明再灌注可能会导致进一步的心肌损伤，造成心肌收缩、舒张功能不全，严重影响心肌功能。这种现象被称为心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia reperfusion injury, MIRI)。MIRI的生理病理机制包括氧化应激、钙超载、细胞自噬、焦亡、内质网应激、细胞凋亡等，其中氧化应激在MIRI相关的细胞死亡中发挥着重要作用，被认为是心肌缺血再灌注损伤的主要机制。氧化应激的发生主要是由活性氧(reactive oxygen species, ROS)的过度产生导致机体或组织的氧化还原系统平衡被打破，大量具有高反应活性的ROS超出心肌细胞抗氧化防御能力，从而对DNA和蛋白等生物大分子进行修饰，造成DNA受损、蛋白功能紊乱、细胞损伤乃至死亡和局部炎症反应等严重反应，通过多种途径介导细胞发生凋亡、自噬以及炎症的损伤，从而造成不可逆的心肌细胞损伤和心肌功能障碍，给临床治疗及预后带来了很大的困难。近年来，对氧化应激在各种器官组织的缺血再灌注(ischemia reperfusion, I/R)损伤的研究取得了很大的进展，但针对恢复心肌缺血区域血流供应时发生氧化应激造成的损伤机制以及中药的保护作用鲜见报道。该文综述了氧化应激在心肌缺血再灌注损伤中的作用、ROS的主要产生途径以及中药对缺血心肌再灌注时发生氧化应激损伤的保护作用，以期为今后的研究和临床治疗提供参考。
2024年13期 v.49 3452-3461页 [查看摘要][在线阅读][下载 1559K] [引用频次：13 ] |[下载次数：2034 ]
- 陈忆菁;朱慧;刘鑫;段煜;裴科;张巧;宋沛祥;蔡皓;
基于炮制和配伍探究山茱萸与黄芪相关组分对糖尿病肾病大鼠血浆代谢组学的影响。SD大鼠随机分为4组，用高脂饲料联合30 mg·kg~(-1)链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病肾病大鼠模型。采用HE、PAS和Masson染色对各组大鼠的肾脏组织切片进行病理学观察。超高效液相色谱-四极杆飞行时间串联质谱(UHPLC-Q-TOF-MS/MS)代谢组学方法研究山茱萸酒制前后与黄芪相关组分配伍给药后对糖尿病肾病大鼠血浆代谢物的影响。给予药物治疗后，糖尿病肾病大鼠的肾组织损伤情况和间质胶原纤维沉积面积均有不同程度的改善(P<0.001)。血浆代谢组学的检测结果显示，在患病大鼠中共鉴定出71种与糖尿病肾病发病机制相关的生物标志物，主要涉及亚油酸代谢，咖啡因代谢，甘油磷脂代谢，苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成，花生四烯酸代谢，苯丙氨酸代谢，视黄醇代谢，乙醚脂质代谢。经药物干预后，其中有26种发生显著性回调，以精准炮制药对(P-CG_5)疗效更好。该研究从血浆代谢组学的角度阐述了P-CG_5可从苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成，苯丙氨酸代谢，咖啡因代谢等途径改善糖尿病肾病的代谢紊乱，为山茱萸与黄芪相关组分配伍在中医临床上的应用提供了理论支撑和实验依据。
2024年13期 v.49 3493-3504页 [查看摘要][在线阅读][下载 3495K] [引用频次：9 ] |[下载次数：2571 ] - 康点点;张蓉蓉;詹琥珀;孙杰玉;蒋桂华;蒋运斌;
基于网络药理学、组分结构理论剖析独一味抗炎有效成分(环烯醚萜苷类：山栀子苷甲酯、8-O-乙酰山栀子苷甲酯；黄酮苷类：木犀草苷；苯乙醇苷类：连翘酯苷B)的协同作用与配伍结构。网络药理学：利用CTD、SwissTargetPrediction、PharmMapper数据库收集并筛选了各有效成分抗炎靶点；通过CTD、GeneCards数据库获得炎症相关靶点；利用Venny 2.1、STRING和Cytoscape 3.9.1得到核心靶点；通过DAVID数据库对核心靶点进行GO功能注释及KEGG通路富集分析。组分结构：基于二甲苯致小鼠耳肿胀模型和均匀设计法，以炎症因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)为因变量，通过二次多项式逐步回归，探究独一味抗炎成分间的配伍关系，并进行体内药效实验验证。网络药理学研究表明，与单一组分相比，3类组分共同作用可通过更多生物过程、通路、靶点协同发挥抗炎作用。组分结构研究表明，环烯醚萜苷组分内(山栀子苷甲酯∶8-O-乙酰山栀子苷甲酯)最佳结构比例为1.21∶1;3类组分间(环烯醚萜苷∶苯乙醇苷∶黄酮苷类)最佳结构比例为4.8∶1.6∶1。综上，独一味各抗炎成分可协同增效，且成分间存在最优配伍比例关系，为独一味内在质量控制提供了新的实验依据。
2024年13期 v.49 3505-3514页 [查看摘要][在线阅读][下载 5072K] [引用频次：3 ] |[下载次数：1429 ] - 林敏;刘秀梅;冯年平;吕雅琪;
调控上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition, EMT)过程是抑制肿瘤生长和转移的重要策略。该研究基于视网膜母细胞瘤的EMT过程，构建同时负载槲皮素(quercetin, QUE)与多柔比星(doxorubicin, DOX)的脂质体，用于研究QUE与DOX联用对视网膜母细胞瘤的治疗作用及其机制。通过单因素考察对槲皮素与多柔比星双载脂质体(QD Lipo)进行处方工艺优化，最终得到球形，粒径(108.87±1.93)nm, PDI 0.13±0.02,Zeta电位(-34.83±1.92)mV的双载脂质体，其中QUE、DOX包封率分别为96.20%±4.40%、 91.17%±4.41%。以人视网膜母细胞瘤Y79作为体外细胞模型，采用共聚焦显微镜证明QD Lipo能提高Y79对其摄取效率。采用CCK-8法证明QUE∶DOX在1∶1～1∶2时具有最佳联合治疗作用。流式细胞技术证明QD Lipo增强了诱导Y79细胞凋亡的能力。通过Western blot技术发现QD Lipo能显著降低EMT通路相关蛋白vimentin和α-SMA的表达，并且荧光法检测到治疗后的Y79细胞内ROS水平显著降低。以上结果显示，脂质体共递送QUE与DOX可提高药物向视网膜母细胞瘤的输送效率，通过下调ROS水平抑制视网膜母细胞瘤的EMT过程，同时增强DOX对视网膜母细胞瘤的杀伤作用。
2024年13期 v.49 3515-3525页 [查看摘要][在线阅读][下载 2432K] [引用频次：0 ] |[下载次数：936 ] - 肖柳君;艾嘉浩;黄飞飞;薛倩倩;甘佳攀;田淑云;陆绍铭;邹佳芬;余文怡;徐鑫;金红利;徐青;
该研究采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱(UHPLC-Q/Orbitrap HRMS)结合分子网络技术快速分析了经典名方清骨散基准样品中化学成分。首先采用ACQUITY UPLC BEH Shield RP_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.7μm),以乙腈-0.1%甲酸水为流动相进行梯度洗脱，流速为0.4 mL·min~(-1),柱温30℃条件下，在加热电喷雾离子源正、负离子2种模式下采集质谱数据。随后将采集的清骨散基准样品质谱数据上传至全球天然产物社会分子网络(GNPS)平台进行计算分析，并运用Cytoscape 3.8.2软件构建可视化分子网络。在此基础上，根据对照品的裂解规律，结合保留时间、高分辨质谱精确相对分子质量、特征碎片离子、文献报道及数据库匹配等信息鉴定清骨散基准样品中的化学成分。最终从清骨散基准样品中共鉴定和推测出105个化学成分，包括19个环烯醚萜苷类、23个黄酮类、15个苯丙素类、11个三萜皂苷类和37个其他类化合物，其中2个成分为潜在的新化合物。该研究采用的方法不仅实现了清骨散基准样品中化学成分的快速、准确鉴定，为清骨散复方制剂的药效物质研究和质量控制提供科学依据，也为中药复方制剂中化学成分的快速鉴定提供参考。
2024年13期 v.49 3526-3539页 [查看摘要][在线阅读][下载 1550K] [引用频次：1 ] |[下载次数：1232 ]
- 郭嘉铭;李林轩;李昕怡;王天玉;朱恩宁;崔龙城;吴凡;刘艳萍;付艳辉;
综合运用硅胶柱色谱、ODS柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及制备型HPLC等多种色谱分离技术对桑科波罗蜜属植物胭脂Artocarpus tonkinensis枝叶中的化学成分进行系统研究。根据分离得到化合物的波谱数据和理化性质，并通过与文献中已经报道的相应化合物的波谱数据和理化性质进行对比，鉴定了从胭脂枝叶的90%乙醇提取物中分离得到的11个化合物，分别鉴定为artocatonkine(1)、5,6,7,4′-四甲氧基黄酮(2)、芹菜素-4′-O-β-D-葡萄糖苷(3)、rayalinol(4)、psorachalcone A(5)、4-ketopinoresinol(6)、ficusesquilignan B(7)、pinnatifidanin AI(8)、pinnatifidanin A(9)、O-methylmellein(10)、trans-4-hydroxymellein(11)。其中化合物1为1个新异戊烯基取代黄酮，化合物2～11为首次从胭脂属植物中分离得到。此外，为了评价化合物1～11的抗类风湿性关节炎活性，采用MTS法对分离得到的化合物1～11的体外抑制滑膜细胞增殖的活性进行了测定。活性评价结果表明黄酮类化合物1～3、5以及木脂素类化合物8、9表现出了较为显著的抗类风湿性关节炎活性，它们对MH7A滑膜成纤维细胞增殖抑制活性的IC_(50)为(6.38±0.06)～(168.58±0.28)μmol·L~(-1)。
2024年13期 v.49 3540-3547页 [查看摘要][在线阅读][下载 1259K] [引用频次：2 ] |[下载次数：402 ] - 劳先磊;吴美珠;郑婷;陈光英;郑彩娟;陈雅林;周金琪;冯硕;周学明;宋鑫明;
应用OSMAC策略，对来源于红树角果木的内生真菌Penicillium herquei JX4进行次级代谢产物及其抗炎活性研究。综合运用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、ODS柱色谱以及半制备高效液相色谱技术对真菌P.herquei JX4的PDB发酵物进行分离纯化以及鉴定，共分离鉴定了2个pinophol类新化合物：pinophol H(1)和pinophol I(2)。对这2个化合物进行了脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞NO生成抑制活性测试，结果表明化合物1具有显著的NO生产抑制活性，其IC_(50)为8.12μmol·L~(-1)。
2024年13期 v.49 3548-3551页 [查看摘要][在线阅读][下载 1162K] [引用频次：2 ] |[下载次数：227 ] - 刘春花;付昌丽;孙佳;陆苑;潘洁;李勇军;王永林;黄勇;潘卫东;
基于UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS联合网络药理学及分子对接技术探究白及“异病同治”黄褐斑、胃肠道出血、肺癌和支气管-肺炎性病变的物质基础和分子机制。利用HPLC建立17批不同产地白及指纹图谱，进行相似度评价；进一步通过UHPLC-Q-Exactive Orbitrap HRMS分析，获得17批白及的共有化学成分；针对共有化学成分，根据生物利用度和类药性筛选活性成分，利用TCMSP和SwissTargetPrediction数据库获取白及活性成分的作用靶点。在DrugBank、TTD、GeneCards数据库中检索疾病相关靶点，绘制韦恩图，获得白及与疾病的共有靶点作为“异病同治”靶点；借助STRING数据库建立蛋白质相互关系，并在Bioconductor数据库中对“异病同治”靶点进行KEGG和GO分析；使用Cytoscape 3.7.2软件构建“白及化学成分-异病同治靶点”网络和蛋白-蛋白相互作用(PPI)网络，拓扑分析筛选出关键活性成分和核心靶点；最后，运用AutoDock Vina 1.1.2软件对活性成分与核心靶点进行分子对接验证。指纹图谱有13个共有峰，不同批次间指纹图谱的相似度在0.941～0.998。鉴定出白及的化学成分53个，17批白及的共有化学成分18个；网络药理学筛选到白及治疗4种疾病的药效物质基础是多糖类、联菲类、二氢菲类和联苄类等11个化合物，异病同治靶点42个，这些靶点参与细胞对化学应激的反应、活性氧的反应和蛋白激酶B信号转导的正调控等生物过程，涉及PI3K-Akt、ErbB、Rap1、FoxO、MAPK和雌激素等121条信号通路；分子对接显示关键活性成分与核心靶点亲和力好。该研究初步阐释了白及通过多成分、多靶点和多通路联合作用发挥治疗黄褐斑、胃肠道出血、肺癌和支气管-肺炎性病变的“异病同治”的作用，为其深入开发和应用提供了一定的理论基础。
2024年13期 v.49 3552-3565页 [查看摘要][在线阅读][下载 3262K] [引用频次：3 ] |[下载次数：1496 ] - 张国鑫;刘佳琪;恽辰珂;郭盛;朱永强;张森;
该研究建立了芦蒿废弃茎叶的UPLC指纹图谱及5个酚酸类成分的一测多评法(quantitative analysis of multi-components by single marker, QAMS)。采用Waters Acquity UPLC BEH C_(18)色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.7μm),流动相为0.1%磷酸水-乙腈，梯度洗脱，流速0.3 mL·min~(-1),检测波长330 nm,柱温30℃,进样量2μL。对指纹图谱的数据进行相似度评价及聚类分析，确定13批次芦蒿废弃茎叶中的15个共有成分。以绿原酸为内参物，分别计算阿魏酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C的相对校正因子，实现了芦蒿废弃茎叶中5个成分含量测定的一测多评法的建立。同时采用外标法测定此5个成分的含量，结果显示一测多评法与外标法测定结果无显著性差异。结果表明，不同品种和不同产地的芦蒿废弃茎叶中的酚酸类成分含量存在明显差异，且木质化后的芦蒿废弃物中的酚酸类含量较未木质化显著提升。综上所述，该研究建立的芦蒿废弃茎叶一测多评法能够快速准确、简便经济地用于芦蒿废弃茎叶中5个酚酸成分的含量测定，为芦蒿废弃茎叶的资源化开发利用奠定了基础。
2024年13期 v.49 3566-3573页 [查看摘要][在线阅读][下载 1502K] [引用频次：3 ] |[下载次数：688 ]
- 杨梦;谈宇权;张君宇;张垚;苏丽清;胡志希;胡思远;
研究参附注射液对慢性心力衰竭小鼠的治疗作用及其对巨噬细胞极化的影响。将C57BL/6J小鼠随机分为正常组、造模组。通过腹腔注射异丙肾上腺素(ISO,7.5 mg·kg~(-1),28 d)建立心力衰竭模型，通过检测心功能、N-端前脑钠肽(NT-pro-BNP)判断模型是否复制成功。将造模成功的小鼠随机分为模型组、参附注射液(SFI)组、TAK-242组，并予以相应药物腹腔注射15 d。利用超声心动图评价心脏功能；HE染色检测病理形态；ELISA检测血清NT-proBNP、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)、精氨酸1(Arg-1)水平；流式细胞术检测心脏巨噬细胞相对含量及M1/M2极化状态；qPCR、Western blot检测Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)通路相关mRNA及蛋白表达变化。结果显示，与正常组比较，模型组小鼠左室射血分数(LVEF)、短轴缩短分数(LVFS)降低，左室舒张末内径(LVIDd)、左室收缩末内径(LVIDs)、NT-proBNP、TNF-α、IL-6升高(P<0.01);心脏组织中巨噬细胞数量增多(P<0.05),M1-F4/80~+CD86~+值上升(P<0.01),M2-F4/80~+CD163~+值下调(P<0.05);心肌组织TLR4、髓样分化因子88(MyD88)、IκB激酶α(IKKα)、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较，SFI组、TAK-242组小鼠LVEF、LVFS、IL-10、Arg-1升高，LVIDd、LVIDs、NT-proBNP、TNF-α、IL-6降低(P<0.05,P<0.01);心脏F4/80~+CD11b~+(巨噬细胞)、M1-F4/80~+CD86~+值下调，M2-F4/80~+CD163~+值上升(P<0.01,P<0.05);心肌组织TLR4、MyD88、IKKα、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。综上，慢性心力衰竭小鼠存在M1/M2型巨噬细胞极化失衡，以M1型巨噬细胞为主；参附注射液可通过调控TLR4/NF-κB信号通路，促进巨噬细胞向M2极化，抑制M1型巨噬细胞活化，减轻心力衰竭炎症反应。
2024年13期 v.49 3574-3582页 [查看摘要][在线阅读][下载 1820K] [引用频次：8 ] |[下载次数：1893 ] - 李晓静;王丽蓉;蒋兵;任春贞;吕欣芳;吴雪;赵会林;赵信科;李应东;
旨在探讨鹿红益心颗粒对心力衰竭大鼠心肌纤维化的影响及可能的作用机制。将60只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组以及鹿红益心颗粒低、中、高剂量组，每组12只。除对照组外，其余各组大鼠通过腹腔注射阿霉素(DOX)诱导心力衰竭模型。将鹿红益心颗粒溶于等量生理盐水，分别予以低、中、高剂量(2.8、5.6、11.2 g·kg~(-1)·d~(-1))进行灌胃，对照组和模型组均给予等量生理盐水，持续灌胃40 d。给药结束后，超声心动图测量左心室射血分数(LVEF)和左心室缩短分数(LVFS);测量大鼠体质量和心脏体质量，计算心脏体质量比；酶联免疫吸附法测定血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-17(IL-17)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、生长刺激表达基因2蛋白(ST2)、N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)、半乳糖凝集素-3(Gal-3)和肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平；苏木素-伊红(HE)染色和Masson染色观察心肌组织病理形态；蛋白免疫印迹法和实时荧光定量聚合酶链式反应分别检测心肌组织中IL-6、IL-17、TNF-α、TGF-β1、Smad3、Smad7、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(COL-Ⅰ)蛋白及其mRNA表达水平。结果显示，与对照组相比，模型组大鼠LVEF、LVFS、心脏体质量比值均显著下降(P<0.05),IL-6、IL-17、TNF-α、TGF-β1、ST2、NT-proBNP、Gal-3、CK-MB水平均显著上升(P<0.05);HE染色可见心肌组织炎性改变；Masson染色显示心脏横截面面积及室腔面积减小且出现不同程度的心肌纤维化(P<0.05);心肌组织中IL-6、IL-17、TNF-α、TGF-β1、Smad3、α-SMA、COL-Ⅰ蛋白及其mRNA表达均显著升高(P<0.05),Smad7蛋白及其mRNA表达显著降低(P<0.01)。与模型组相比，鹿红益心颗粒低、中、高剂量组大鼠LVEF、LVFS及心脏体质量比值均显著上升(P<0.05),IL-6、IL-17、TNF-α、TGF-β1、ST2、NT-proBNP、Gal-3、CK-MB水平均下显著下降(P<0.05);HE染色显示心肌组织炎性改变逐渐减轻；Masson染色显示心脏横截面面积及室腔面积增大，心肌纤维化面积减少(P<0.05);心肌组织中IL-6、IL-17、TNF-α、TGF-β1、Smad3、α-SMA、COL-Ⅰ蛋白及其mRNA表达均显著降低(P<0.05),Smad7蛋白及其mRNA表达均显著升高(P<0.05)。综上所述，鹿红益心颗粒可能通过调节TGF-β1/Smads信号通路，抑制炎症相关蛋白表达，减少细胞外基质的沉积，缓解心肌纤维化，对心力衰竭的治疗具有重要价值。
2024年13期 v.49 3583-3590页 [查看摘要][在线阅读][下载 2791K] [引用频次：8 ] |[下载次数：662 ] - 刘静淑;岳进茹;李玉彤;李振;
探讨二妙散通过α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAchR)-Janus激酶2(JAK2)/信号转导及转录激活因子3(STAT3)途径改善类风湿关节炎大鼠炎症的免疫学机制。56只雌性Wistar大鼠随机分为正常(HG)组、胶原诱导性关节炎模型(CM)组、迷走神经切断(VA)组、假手术(SH)组、二妙散治疗模型(EM)组、二妙散治疗迷走神经切断(EV)组、二妙散治疗假手术(ES)组，每组8只。除HG组外，其他组均构建胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型，造模成功后进行颈部单侧迷走神经切断术及假手术(仅分离迷走神经),术后7 d开始给药治疗，持续治疗35 d。记录大鼠体质量及关节情况，观察大鼠脾脏病理学变化，ELISA检测大鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量，qRT-PCR、Western blot和免疫组化检测脾脏中α7nAchR-JAK2/STAT3通路核心基因mRNA及蛋白表达。结果显示，CM组对比HG组、VA组对比CM组和SH组，大鼠体质量显著降低(P<0.05,P<0.01),关节炎评分显著升高(P<0.05,P<0.01),踝关节明显肿胀伴畸形，脾脏淋巴小结显著增大，血清中IL-6、IL-1β、TNF-α含量显著增加(P<0.05,P<0.01),脾脏中JAK2、STAT3 mRNA水平显著升高(P<0.05,P<0.01),磷酸化JAK2(p-JAK2)/JAK2、磷酸化STAT3(p-STAT3)/STAT3水平显著升高(P<0.05,P<0.01),JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3细胞数增加(P<0.05,P<0.01)。EM组对比CM组、ES组对比SH组，大鼠体质量显著升高(P<0.01),关节炎评分显著下降(P<0.05,P<0.01),踝关节肿胀度明显减轻，脾脏淋巴小结体积减小，炎症减轻，血清中IL-6、IL-1β、TNF-α含量显著下降(P<0.05,P<0.01),脾脏JAK2、STAT3 mRNA表达显著降低(P<0.05,P<0.01),p-JAK2/JAK2、p-STAT3/STAT3水平显著降低(P<0.05,P<0.01),JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3细胞数量显著减少(P<0.05,P<0.01),α7nAChR mRNA及蛋白表达显著上升(P<0.01)。EV组对比VA组，大鼠体质量上升及关节炎评分无明显差异，脾脏淋巴小结数量减少不显著，体积仍较大，炎症无明显改善，血清IL-6、IL-1β、TNF-α含量表达不显著，脾脏中α7nAChR、JAK2、STAT3 mRNA无明显差异，脾脏中p-JAK2/JAK2、α7nAChR蛋白表达显著降低(P<0.05,P<0.01),p-STAT3/STAT3蛋白表达不显著，JAK2、p-JAK2、STAT3、p-STAT3细胞数量无明显差异。以上实验结果显示，单侧迷走神经切断促进磷酸化的JAK2和STAT3表达增加，加剧炎症状态，二妙散通过迷走神经激活α7nAChR介导的JAK2/STAT3途径改善CIA大鼠炎症，提示α7nAchR-JAK2/STAT3途径可能是治疗类风湿关节炎的潜在靶标。
2024年13期 v.49 3591-3599页 [查看摘要][在线阅读][下载 2008K] [引用频次：4 ] |[下载次数：1366 ] - 李婷婷;张程斐;郭翔宇;
基于Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)/髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)/核因子κB(nuclear factor kappaB,NF-κB)信号通路，观察人参皂苷Rb_1(ginsenoside Rb_1,Rb_1)对db/db肥胖小鼠肝脏脂代谢的调节作用，并探究其潜在的作用机制。30只6周龄雄性db/db小鼠按体质量及空腹血糖随机分为模型组，二甲双胍组，Rb_1低、中、高剂量组，每组6只。另设6只同周龄雄性db/m小鼠作为正常组，共干预5周。每周测量小鼠体质量、空腹血糖、摄食量，实验结束后，收集小鼠血清检测血脂及肝功能。苏木素-伊红染色、油红O染色观察肝脏组织病理变化。实时荧光定量PCR和免疫组织化学法分别检测TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA和蛋白表达。结果显示，与正常组相比，模型组小鼠体质量、肝质量、肝脏指数、附睾脂肪质量、附睾脂肪指数、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、肝功能参数、空腹血糖显著升高；肝脏内脂肪蓄积显著增加；肝脏TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达显著增加。经Rb_1处理后，干预组小鼠上述指标明显逆转。总之，Rb_1可改善小鼠肥胖及肥胖相关性肝脏脂肪变性，同时具有调节血脂和糖代谢异常的作用，从机制分析Rb_1可能通过调控TLR4/MyD88/NF-κB信号通路改善db/db肥胖小鼠肝脏脂肪变性。
2024年13期 v.49 3600-3607页 [查看摘要][在线阅读][下载 3347K] [引用频次：3 ] |[下载次数：1088 ] - 陈可点;高双荣;刘雪婷;林娜;张彦琼;
经前期综合征(PMS)缺乏与中西医临床诊疗标准吻合度高、可行性好且表现稳定的动物模型，导致其发病机制、药效药理的相关研究缺乏可靠的实验载体。该研究旨在从“病-证-症”关联视角，系统解析PMS的生物内涵，在此基础上建立黄体酮撤退与情志刺激结合诱导型PMS动物模型，并对其进行客观评价。首先通过GeneCards、DisGeNET、MalaCards和中医证候本体及多维定量关联计算平台(SoFDA)数据库与已发表文献，收集PMS现代医学与中医诊疗标准中肝郁气滞与气滞血瘀证型相关的临床症状基因集，并依据基因间相互作用信息，建立PMS的“病-证-症”关联网络。基于数据挖掘结果，在经典黄体酮撤退模型基础上，结合慢性束缚刺激，模拟临床发病过程中由外部环境刺激引起的情绪抑郁，从生理与情志2个维度引起病理损伤，制备PMS大鼠模型，评价2种造模条件下的模型在旷场实验得分，脏器指数，卵巢病理变化，血清雌二醇(E_2)、促卵泡激素/促黄体生成素(FSH/LH)、5-羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)水平及凝血四项、血流变指标。通过计算“病-证-症”关联网络节点在网络中的度值、介度和接近度，筛选出163个具有网络拓扑重要性的核心基因。进一步的生物功能挖掘结果表明，PMS核心基因主要参与“神经-内分泌-免疫”系统与血液循环障碍相关通路的调控；临床表型症状基因集映射分析提示，PMS核心基因与抑郁症状及血瘀所致肿痛症状显著相关。与单纯的黄体酮撤退模型相比，注射与束缚双重刺激的大鼠在旷场实验水平得分与总分，卵巢组织病理变化，血清神经递质5-HT与DA水平，血清性激素E_2与FSH/LH水平的异常改变均更为显著，且注射加束缚条件加剧了模型大鼠血液流变性、凝血功能和红细胞形态的病理改变，证实了该大鼠模型能够表征PMS发生、进展中的“神经-内分泌-免疫”系统紊乱与血液循环系统障碍，与该疾病的中西医临床诊疗标准相符。黄体酮撤退与情志刺激结合诱导型PMS大鼠模型的建立能够为PMS发病机制的阐释、治疗药物的发现与药效评价提供可靠的实验载体，也为客观化反映PMS中西医临床表征与精准治疗提供参考。
2024年13期 v.49 3608-3618页 [查看摘要][在线阅读][下载 4058K] [引用频次：1 ] |[下载次数：537 ] - 秦合伟;孙孟艳;王梦楠;刘丹丹;高洋;
基于核因子红细胞系2相关因子2(nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)/血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)/谷胱甘肽过氧化酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)信号通路观察黄芪甲苷(astragalosideⅣ,AS-Ⅳ)对ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化的干预作用，探究AS-Ⅳ改善动脉粥样硬化小鼠铁死亡的潜在机制。该研究通过采用高脂饲料喂养建立动脉粥样硬化小鼠模型。造模8周后将ApoE~(-/-)小鼠随机分为模型(model)组、AS-Ⅳ组、AS-Ⅳ+Nrf2抑制剂(ML385)组和ferrostatin-1(Fer-1)组，同时另设对照(control)组，分别给予相应药物腹腔注射治疗，control组与model组进行等量生理盐水腹腔注射。实验结束后采用全自动血脂分析仪检测血清生化水平，HE染色观察主动脉窦组织形态学变化，比色法检测各组小鼠血清中Fe~(2+)、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、谷胱甘肽(glutathione, GSH)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)水平，免疫荧光观察各组小鼠主动脉窦铁蛋白重链1(ferritin heavy chain 1,FTH1)、铁蛋白轻链(ferritin light chain, FTL)蛋白表达，Western blot法检测小鼠主动脉脏组织Nrf2、HO-1、GPX4蛋白水平，透射电镜观察主动脉组织超微结构改变。结果显示，与control组比较，model组小鼠主动脉窦钙化面积及斑块沉积面积明显，线粒体膜密度增加、线粒体嵴减少或消失，血清总胆固醇(total cholesterol, TC)、甘油三酯(triglyceride, TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol, LDL-C)、Fe~(2+)、MDA水平升高，高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol, HDL-C)、SOD、GSH水平下降，主动脉Nrf2、HO-1、GPX4蛋白及铁储存蛋白FTH1、FTL表达明显抑制；与model组相比，AS-Ⅳ治疗后血清TC、TG、LDL-C、Fe~(2+)、MDA水平下降，HDL-C、SOD、GSH水平上升，主动脉Nrf2、HO-1、GPX4蛋白及铁储存蛋白FTH1、FTL蛋白表达增加，主动脉组织形态学明显改善；与AS-Ⅳ组相比，Nrf2抑制剂ML385能逆转AS-Ⅳ对AS小鼠的治疗作用。以上表明，AS-Ⅳ可抑制铁死亡改善ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化，其作用机制可能与调控Nrf2/HO-1/GPX4信号通路有关。
2024年13期 v.49 3619-3626页 [查看摘要][在线阅读][下载 1537K] [引用频次：7 ] |[下载次数：2825 ] - 罗然;邓思琦;赵音旭;王璐;任文康;邹宇;林宇;卜明;
基于网络药理学方法探究过氧麦角甾醇(EP)抗乳腺癌的靶点及作用机制，并通过体外实验验证。采用网络药理学对EP作用靶点进行筛选，构建靶点网络及蛋白-蛋白互作(PPI)网络，对EP抗乳腺癌潜在的作用靶点及相关通路进行预测。采用MTT法检测EP对乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制活性，克隆形成实验检测EP对MCF-7细胞增殖影响；采用流式细胞术和激光共聚焦显微镜检测细胞的凋亡情况、线粒体膜电位及活性氧水平的变化情况；通过Western blot法检测EP对B细胞淋巴瘤(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C(Cyt C)、半胱氨酸蛋白酶蛋白(caspase)-7、活化的caspase-7(cleaved caspase-7)、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝氨酸-苏氨酸激酶B(AKT)蛋白表达水平的影响情况。结果显示，经网络药理学预测，得出EP与乳腺癌有173个共同靶点；KEGG富集分析结果显示EP治疗乳腺癌结果主要在癌症通路、PI3K-AKT信号通路、细胞衰老信号通路、病毒致癌作用等信号通路；MTT结果显示，与对照组相比，EP组MCF-7细胞的活性明显降低，呈时间-浓度依赖趋势；EP能够抑制乳腺癌细胞MCF-7集落形成；采用10、20、40μmol·L~(-1)的EP作用MCF-7细胞24 h后，MCF-7细胞总凋亡率均显著升高，线粒体膜电位均显著降低，活性氧水平均显著升高；此外，MCF-7细胞经过EP处理后，细胞内Cyt C、Bax、cleaved caspase-7蛋白的表达水平上升，p-PI3K、p-AKT、Bcl-2蛋白的表达水平下降。研究表明，EP可抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖，减少集落形成，其机制可能与PI3K-AKT通路介导线粒体凋亡途径有关。
2024年13期 v.49 3627-3635页 [查看摘要][在线阅读][下载 1754K] [引用频次：3 ] |[下载次数：1412 ] - 胡佳;刘红宁;尚广彬;李冰涛;严小军;
体外模拟肠道缺氧微环境探索葛根芩连汤(GQD)抑制炎症性缺氧下巨噬细胞M1极化的效应及作用机制。利用三气培养箱模拟结肠正常生理性缺氧和溃疡性结肠炎(UC)炎症性缺氧微环境，将RAW264.7巨噬细胞分为18.5%O_2(常氧)组、4%O_2(生理性缺氧)组、1%O_2(炎症性缺氧)组，脂多糖(LPS)诱导24 h,流式细胞术检测M1极化情况。在1%炎症性缺氧条件下分为空白组，模型组，葛根芩连汤含药血清低、中、高剂量组，流式细胞术检测M1极化标志物CD86,ELISA法检测细胞上清液肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达；qRT-PCR检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、TNF-α、IL-1β mRNA表达；Western blot检测HIF-1α/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路相关蛋白表达情况；免疫荧光法检测NF-κB p65入核情况。结果表明，1%O_2组CD86阳性率最高；1%炎症性缺氧条件下，与空白组相比，模型组CD86、TNF-α、IL-1β、HIF-1α表达升高，与模型组比较，GQD各剂量能降低CD86、TNF-α、IL-1β、HIF-1α表达。与空白组比较，模型组HIF-1α、NF-κB p65、p-IKKα/β、p-IκBα蛋白表达升高；与模型组比，GQD各组HIF-1α、NF-κB p65、p-IKKα/β、p-IκBα蛋白表达明显降低。与空白组比较，模型组NF-κB p65入核明显；与模型组比较，GQD各剂量显著降低NF-κB p65入核表达。研究表明1%炎症性缺氧条件下GQD可能通过下调HIF-1α/NF-κB信号通路抑制M1巨噬细胞极化及相关炎症因子分泌发挥保护肠道作用。
2024年13期 v.49 3636-3643页 [查看摘要][在线阅读][下载 1625K] [引用频次：7 ] |[下载次数：1785 ] - 王蕾;贾菁楠;王依琳;李毅乐;邹倩倩;张硕;崔应麟;
为探讨经典名方散偏汤对慢性偏头痛的作用机制，该研究采用4D-DIA蛋白质组学技术分析其对慢性偏头痛模型大鼠的干预影响，并对关键差异蛋白进行实验验证。首先将SD雄性大鼠随机分组，反复注射硝酸甘油制备慢性偏头痛模型。连续灌胃7 d后，采用大鼠痛苦面容量表(RGS)评估药效。取三叉神经节进行4D-DIA相对定量蛋白质组学检测，筛选各组差异蛋白，结合多个数据库进行基因本体论(Gene Ontology, GO)功能和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG)通路富集分析；使用STRING数据库及Cytoscape软件进行蛋白-蛋白互作(PPI)网络分析，并对关键差异表达蛋白TRPV1进行蛋白免疫印迹法(Western blot)检测。结果显示，空白组与模型组间有517个差异表达蛋白，模型组与散偏汤中剂量组间有221个差异表达蛋白。GO功能和KEGG通路富集分析显示，差异表达蛋白主要与炎症反应、伤害性感受刺激、甘油三酯代谢、免疫调节等相关，主要集中在炎症相关TRP通路、AMPK信号通路、PI3K-Akt信号通路、TGF-β信号通路等。PPI网络显示，IGF、TOP2A、APOA1、CDK1、TTN、RYR1、CSRP3等靶蛋白具有较高的度值(degree)。Western blot结果显示，与模型组比较，散偏汤中、高剂量组TRPV1表达水平差异有统计学意义(P<0.05)。综上，散偏汤可能通过调节TRP、AMPK、PI3K-Akt等炎症相关通路治疗慢性偏头痛，其对TRPV1蛋白的调节发挥了重要作用，并对伤害性刺激感受、脂代谢和免疫反应等具有潜在的调节作用。
2024年13期 v.49 3644-3656页 [查看摘要][在线阅读][下载 3599K] [引用频次：1 ] |[下载次数：1175 ] - 江威;赵秋萍;黄琳;姜家旺;李明莉;陈小春;徐燕;王国娟;邓兰;张磊昌;李志明;
借助网络药理学和分子对接预测加味活络效灵丹抗结直肠癌(colorectal cancer, CRC)可能的作用靶点及相关信号通路，并通过实验验证。采用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)获取加味活络效灵丹的活性成分及靶点，利用GeneCards、DrugBank、OMIM、TTD数据库获取CRC的相关靶点，Cytoscape软件构建药物-活性成分-靶点网络，STRING数据库构建蛋白-蛋白互作(PPI)网络，DAVID平台对靶点进行基因本体论(Gene Ontology, GO)功能和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG)通路富集分析，AutoDock Vina进行分子对接。设置不同浓度加味活络效灵丹含药血清组分别处理HCT 116细胞，利用cell counting kit-8(CCK-8)检测各组HCT 116细胞增殖抑制情况，Transwell检测HCT 116细胞侵袭能力，蛋白免疫印迹法(Western blot)检测β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、V-Myc骨髓细胞瘤病毒癌基因同源物(c-Myc),以及上皮间质转化(EMT)标志蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶7(MMP7)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、转录因子TWIST的表达水平。网络药理学分析，得到加味活络效灵丹活性成分242个，CRC靶点1 844个，CRC与加味活络效灵丹交集靶点127个，与CRC相关的信号通路涉及PI3K-Akt、TNF、HIF-1、IL-17、Wnt等。分子对接显示，主要活性成分与核心蛋白有较稳定的结合构象。CCK-8检测显示，加味活络效灵丹能显著抑制HCT 116细胞的增殖；Transwell检测显示，随着加味活络效灵丹含药血清浓度的增加，抑制HCT 116细胞的侵袭能力越明显；经含药血清处理后，β-catenin、cyclinD1、c-Myc、N-cadherin、vimentin、MMP2、MMP7、MMP9和TWIST蛋白表达受抑制，E-cadherin表达上调。结果表明，加味活络效灵丹通过多成分、多靶点、多途径抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭和转移，其机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路激活，从而影响EMT的发生有关。
2024年13期 v.49 3657-3667页 [查看摘要][在线阅读][下载 3033K] [引用频次：3 ] |[下载次数：2449 ]